急性胰腺炎模型方法和慢性胰腺炎模型方法都有多种,如果研究中考虑感染因素在急性胰腺炎或者慢性胰腺炎中的作用,可以采用该方法。如果不考虑或者不涉及感染因素,则可以考虑使用其他方法,比如,急性胰腺炎模型方法(CDE饲料诱导法)或者慢性胰腺炎模型方法(环孢菌素法)。
酒精能够增强胰腺发生炎症的敏感性(增敏作用)。一般认为,长期饮酒会损伤肠粘膜屏障,内毒素可能在胰腺炎发生中发挥作用。因此,用Lieber-DeCarli酒精液体饲料喂养大鼠后,注射Lipopolysaccharide (LPS,脂多糖)用来复制胰腺炎,将酒精作为致病因素,将感染(内毒素)作为诱导因素,从而复制胰腺炎。
该方法复制模型的特点是:动物死亡率低,实验成本低,酒精和内毒素联合,模拟了长期酗酒者发生慢性胰腺炎、胰腺纤维化的病理过程,比较符合临床情况,可用于胰腺炎发病机制的研究。
该方法可以在大鼠和小鼠中使用,但要注意酒精热量有差别(下面有说明),此外,既可以复制急性胰腺炎模型,也可以复制慢性胰腺炎模型,下面分别叙述。
(1)Lieber-DeCarli酒精液体饲料(标准型)。如果使用小鼠,酒精应当是3%。
(2)动物:大鼠使用雄性SD大鼠(体重110-130克)。小鼠用雄性C57BL6。
(3)LPS:从Sigma公司购买(LPS from E.Coli B26:026,1mg/vial,lyophilised powder, n° L2654)。在使用前,用生理盐水溶解,并稀释到5 mg/ml,也就是每小瓶中加入生理盐水200微升。
模型方法的大致步骤如下:
(1)动物适应1周后,随机分组,分为Lieber-DeCarli对照液体饲料组,Lieber-DeCarli酒精液体液体饲料组,每组再分为生理盐水注射对照组和LPS注射组。
(2)Lieber-DeCarli对照液体饲料组给予对照液体饲料,Lieber-DeCarli酒精液体饲料组给予酒精液体饲料,喂养10周。Lieber-DeCarli酒精液体饲料组在第一周采取过渡喂养。
(3)在第10周结束时,LPS组尾静脉注射LPS,每只动物按体重注射LPS 3mg/kg,一周内注射3次。对照组注射等量生理盐水。
(4)在最后一次注射后24小时处死动物,取标本。
模型评价:
(1)该模型方法简单。但是,操作者在LPS注射前,应当熟练掌握动物的尾静脉注射。
(2)模型表现为:腺泡萎缩,腺泡周围纤维变性。
(3)酒精和LPS注射组的胰腺正常。
模型方法与上面慢性胰腺炎模型各步骤相同,但是,在步骤(3)中只注射一次LPS。
模型情况:
腺泡细胞坏死,空泡样改变,炎症渗出,出血。
以上模型方法中,关键在于采用Lieber-DeCarli酒精液体饲料喂养期间,要注意逐步增加酒精量。保障动物摄入足够量的酒精。建议阅读“Lieber-DeCarli酒精液体饲料和使用注意点”。
本法的参考文献可从南通特洛菲饲料科技有限公司技术部索取。
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可以任意缺乏或过载某营养素
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