动物存在自然死亡,意思是,即便饲养或喂养得当也会出现死亡现象。在使用酒精液体饲料时,由于酒精的作用,死亡率提高是正常现象。但是,有的研究者使用中发现动物死亡率较高,有的甚至大批死亡,而与之相反的是,绝大多数研究者使用时死亡率并不很高,都能获得预期的喂养效果。
优点:
动物直接吸入,血液酒精浓度可以达到很高值,并且可以任意控制血液酒精浓度。
缺点:
由于直接通过呼吸道吸入,不是经过消化道吸收和门静脉首选到达肝脏,不符合人类的饮酒情况。最大的缺点是,动物受到酒精的作用情况下,食物摄入受到影响,难以控制食物摄入量尤其是营养素摄入,因此,其中很可能包含了动物摄入营养素不足所致的效应,影响研究结论的可靠性。
用途:
可以用于酒精对神经系统的作用,尤其是急性作用。
高死亡率。后果不仅仅在于使得试验无法进行,更糟糕的是,没有死亡的动物也因为包含了喂养不当导致的机能改变而没有使用价值。
推荐方法:
下图一是文献中采用的吸入装置,下图二是相应处理的大鼠血液酒精浓度。
优点:
符合人类的饮酒的生理过程,喂养方法简单,无需特殊设备和器材。
与饮水中添加酒精相比,酒精液体饲料引起的血液酒精浓度(BAC)可达2-3倍。
缺点:
在大鼠、小鼠、兔等动物中血液酒精浓度升高程度受到限制,难以达到高水平。
应用:
一般用于血液酒精浓度为轻度至中等程度的研究。除了要求血液酒精浓度很高的疾病模型(如酒精性肝硬化、酒精性胰腺炎),一般都可以采用酒精液体饲料喂养法。
酒精液体饲料:
1. IEI法(胃管连续灌注法, Intragastric Ethanol Infusion Model)
该方法在Tsukamoto-French模型酒精液体饲料做了详细介绍。
优点:
符合人类的饮酒的生理过程,在动物能够耐受的范围内可以使血液更高酒精浓度达到最高水平,并且可以任意控制血液酒精浓度。可以确保动物获取的营养素平衡。
缺点:
属于强制饲养(“强饲”),与人类饮酒和饮食相差较大,饮食量人为控制,血液酒精浓度比较恒定。
应用:
多用于肝脏疾病(肝硬化)、胰腺疾病等要求血液酒精浓度很高的情况。
酒精液体饲料:
或,Thompson-Reitz酒精液体模型饲料(TP5100)
2. 肠内营养法(TEN法, Total Enteral Nutrition)
与以上IEI法类似,不同的是,无需采用连续灌注,液体饲料也不同。
所用液体饲料:
优点:
可以根据动物的承受能力尽可能提高血液酒精浓度。操作方便。
缺点:
这种方法与人类的饮酒相距很大。影响食物摄入量,从而难以控制食物摄入改变引起的营养素摄入,研究结果中很可能包含了营养素摄入改变所致的干扰效应,难以判断生理生化指标的改变是酒精的作用,还是营养素改变的作用。
用途;
可用于观察血液酒精对胃肠道的作用,血液酒精对结肠内菌群的作用。
优点:
可以有效控制给予的酒精量。操作相对简单。
缺点:
容易操作失误;对胃肠道有刺激甚至损伤;属于急性效应(一次注射导致血液酒精峰值然后很快下降,对生理机能具有冲击性),不宜进行慢性实验研究。最大的问题是,灌胃造成的所谓酒精效应不可靠,原因是酒精改变动物的食物摄入量,很可能导致营养素摄入改变,从而误认为是酒精的效应。
用途:
急性实验;其他方法基础上酒精加量。
优点:
强迫性获得酒精,容易升高血液酒精浓度;方法最简便。
缺点:
难以将酒精热量与饮食热量和营养素结合,例如,在酒精饮用后动物摄食量改变,导致营养素尤其是维生素、矿物质和膳食纤维等等的摄入量波动(减少,甚至出现营养素缺乏)。
用途:
短期行为改变。慢性实验情况下这是最不可取的方法。
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可以任意缺乏或过载某营养素
可以任意添加药物或测试成分
可以精确定量饲料摄入量
可以任意定制饲料