蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12联合缺乏的饲料
Methionine-Choline-Folate-Vitamin B12 deficient diet,
Lipotrope diet, LD diet, or LDD

蛋氨酸(Methionine, Met)、胆碱(Choline)、叶酸(Folic acid，或，Folate)、维生素B12（钴胺素, Cobalamin)是细胞内甲基代谢和同型半胱氨酸代谢的四大金刚。请看下图。

在上图中，我们看到SAM是甲基化的甲基直接提供者。图中，维生素B12是让同型半胱氨酸转变成蛋氨酸，而BHMT是将甜菜碱（来自胆碱）中的甲基拿出来让蛋氨酸再形成。而叶酸呢，不仅与甲基形成有关(Methyle THF, 甲基四氢叶酸)，而且与DNA合成有关，维生素B2不仅在传递甲基中发挥关键作用，而且在四氢叶酸(THF)再形成中发挥关键作用，因此，与叶酸共同影响DNA合成(DNA synthesis）。

因此，蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12的缺乏饲料喂养动物，对于细胞功能产生非常广泛的影响。正因为如此，一般用于复制甲基缺乏模型（见“甲基缺乏饲料”）、高同型半胱氨酸模型（见“高同型半胱氨酸血症模型”）以及脂肪代谢异常模型（见“Lipotrope缺乏饲料”）。

购买和使用蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12缺乏饲料时，应当注意以下几点：

►由于胱氨酸与蛋氨酸之间的关系，该模型饲料中胱氨酸含量应当控制在标准水平，否则，胱氨酸含量的过高或者过低均影响研究结果。

►虽然这种饲料可以像平时喂养的饲料那样配制（日粮型），但是，为了保障胱氨酸含量处于适宜水平，以及其他氨基酸保持平衡，应当使用纯化的原料来配制（纯化型饲料），尤其是应当优先采用以氨基酸替代蛋白质的纯化型饲料（化学定义型饲料）。

►除了蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12这四种营养素缺乏之外，其他所有营养素应当控制在标准水平。有些研究者向饲料供应商购买这样的模型饲料时只关心饲料中这四种营养素缺乏的水平，而忽视其他营养素，这是危险的，虽然这四种营养素缺乏能够满足模型复制的需要，但是，在模型上开展各种生物学机制时，饲料中的其他营养素不正常可在此时影响研究结果，出现假阳性或者假阴性结果。

►叶酸和维生素B1在肝脏中贮存，贮存量与饲料中的含量有关，饲料中越多，肝脏中贮存越多，反之亦然。因此，购买的动物如果先前使用的饲料中叶酸和维生素B12过多，则在使用蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12缺乏饲料喂养后，需要更长时间才能出现缺乏现象。由于在喂养之后动物缺乏蛋氨酸和缺乏胆碱的效应很快出现，而叶酸和维生素B12的缺乏迟迟不出现，这种情况下，表面上看动物已经有所异常，但实际上只是蛋氨酸和胆碱缺乏的效应，这时与其说使用的是蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12缺乏饲料，倒不如说是采用了蛋氨酸、胆碱缺乏饲料(MCD饲料)。因此，建议在使用蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12缺乏饲料之前，采用标准饲料喂养动物一段时间，让动物处于标准状态。毫无疑问，这事关研究结果是否能重复他人的研究结果，也事关自己的研究结果是否能被他人重复。

►由于实验动物肠道中有细菌合成叶酸和维生素B12，肝脏中又存在叶酸和B12，因此，饲料中叶酸和维生素B12的含量应当尽可能低。

最后，要提醒的是，蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12缺乏饲料有两种类型，一种是标准饲料基础上缺乏蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12，另一种是高脂肪但缺乏蛋氨酸、胆碱、叶酸和维生素B12的饲料，这种饲料一般是用于脂肪代谢异常模型的复制，比如复制脂肪肝、肝纤维化、肝硬化、动脉粥样硬化、高血脂等等。怎么知道是否采用高脂肪型，请见“高脂肪Lipotrope缺乏饲料”。