兔非酒精性脂肪肝、肝纤维化和肝硬化模型复制方法

兔是复制非酒精性脂肪肝常用的实验动物，主要原因是肝脏脂肪代谢对于刺激比较敏感。关于脂肪肝模型复制的方法，在“非酒精性脂肪肝模型建立方法”已经介绍。在“大鼠非酒精性脂肪肝、肝纤维化和肝硬化模型复制方法”的介绍中可以看到，当前可用于复制非酒精肝纤维化和肝硬化模型的方法很少，在一般实验小鼠中几乎无法实现，而在大鼠中也只有应用lipotrope缺乏饲料（方法见"大鼠非酒精性脂肪肝、肝纤维化和肝硬化模型复制方法"）。

这里就兔中复制非酒精性的肝脏纤维化模型和肝硬化模型进行介绍。

上图是多个肝脏的外观。
下图是镜下观察。
图片来自文献中的截图。

Lipotrope缺乏饲料(lipotrope deficient diet)有标准热量型和高脂肪型Lipotrope缺乏饲料（务必点击超链接了解这些饲料的情况），都包括胆碱缺乏饲料，氨基酸配制的胆碱缺乏饲料(CDAA diet)，蛋氨酸和胆碱缺乏饲料，高脂肪、低蛋白、胆碱缺乏饲料，以及胆碱、蛋氨酸、维生素B12、叶酸缺乏饲料。

在兔中用胆碱缺乏饲料复制肝硬化最早可以追溯到1940年的研究论文，并且在随后的20年中有几篇论文对这种肝硬化进行了研究。

例如，用胆碱缺乏饲料喂养兔（体重500g～1kg），很快发生脂肪肝，大约在45天左右已经有兔发生了肝硬化，66天后几乎都发生了肝硬化。这提示我们，用胆碱缺乏饲料复制肝纤维化模型，需要的时间大约在45天左右。

缺胆碱饲料喂养的兔中，肝脏脂肪含量大约是正常兔的3-4倍，肝脏外观为结节状肝硬化，结节大约1-5mm、浅黄色至红色，镜下可见正常结构消失，假小叶，结缔组织中胶原丰富并分隔假小叶。

在有的兔中可见腹水。胆碱缺乏兔的死亡率大约为10%。

要注意的是，肾脏病理异常。

左列（A、C、E）为标准喂养的兔肝脏。
右列（B、D、F）是高脂肪高胆固醇饲料喂养的兔肝脏。
图片来自文献中的截图。

在上世纪中期发现，用高胆固醇饲料喂养兔，可以发生肝纤维化和肝硬化，说明兔中建立肝纤维化和肝硬化模型比较容易。

兔喂养高脂高胆固醇饲料可以发生非酒精性脂肪肝，一般为期2个月。如果延长喂养时间，让肝脏病变得以进一步发展成肝纤维化和肝硬化，面临的问题是，兔容易死亡。因此，需要降低脂肪含量和胆固醇含量。

为避免容易死亡的问题，在最近的文献中，将高脂肪高胆固醇饲料中的脂肪和胆固醇含量和胆固醇含量均调低，这样喂养的兔约在8个月时肝纤维化已经很明显，并且已经有肝硬化表现，到9个月时几乎所有兔都发展成了肝硬化。

图中显示的是文献中的图片截图。肝脏灰白色，表面凹凸不平，有小结节，胶原纤维化增生并且主要围绕中央静脉区周围，在中央静脉和中央门静脉之间形成桥样纤维化（纤维间隔），肝细胞退变，肝细胞中脂肪和胆固醇大量沉积。

可见主动脉中发生动脉粥样硬化状改变。